導言

紫外可見分光光度計在藥廠有著廣泛的應用，根據藥典通則0401《紫外-可見分光光度法》規定，企業需要定期校驗紫外—可見分光光度計，校驗內容主要包括了波長準確度、吸光度準確度和雜散光三個檢驗項目，有些客戶自己校驗時會失敗，而這三個項目中又以吸光度準確度測試失敗率最高。

藥廠小伙伴一般是使用重鉻酸鉀溶液校驗紫外可見分光光度計，準確稱量和配制一般難不住大家，但是有些小細節如果不注意會導致校驗的失敗，下面介紹一下吸光度準確度測試的注意點：

01實驗室溫度

藥典中并沒有明文規定校驗時的實驗室溫度，正常情況下校驗應該是在20℃下進行的，那么溫度對溶液的吸光度有影響嗎？根據《JJG 178紫外可見近紅外分光光度計》的數據，60mg/L重鉻酸鉀溶液在235nm下，10℃時透過率為18.0%換算為吸收系數是124.1，而30℃時透過率為18.3%換算吸收系數為122.9，而235nm處允許的吸收系數為123.0-126.0，在30℃時本身就已經不滿足校驗要求了，所以溫度這一點一定要特別注意。

02比色皿的使用

實驗需要使用潔凈的比色皿，對于有污垢的比色皿可以使用洗液浸泡，確保表面無劃痕。按照一般的實驗要求，使用待測溶液潤洗三次以上就可以認為消除了比色皿殘留溶劑的影響，而實際上在進行儀器校驗時，潤洗的要求會高很多，根據實驗，進行6次以上的潤洗可以比較可靠的保證潤洗效果。同時由于比色皿兩個通光面的光學性能不一定完全一致，在使用比色皿時，要注意調零和測試時比色皿通光面的方向不能改變。

03比色皿的選擇

目前的紫外可見分光光度計都是雙光路的儀器，本身可以消除參比光路和樣品光路的皿差，所以大家使用時并沒有特別注意比色皿的選擇，但是進行儀器校驗時，比色皿通光面材料的不均勻性、比色皿本身透過率的誤差、比色皿尺寸的誤差等都會導致校驗不通過，建議使用質量較好配對的比色皿（比色皿配對要求可參考《JJG 178紫外可見近紅外分光光度計》4.10吸收池的配套性）。

04比色皿架

比色皿架起到固定比色皿的作用，而對于一些使用時間比較久的儀器，比色皿架的定位簧片（下圖所示）已經老化了，起不到固定比色皿的作用，這樣在測試時會導致光通過比色皿的不同位置，將比色皿本身不同位置透過率的誤差帶入到結果中，在校驗時也需要注意這個影響。

05試劑

重鉻酸鉀有不同的試劑等級，建議選用優級純或者基準級試劑，以避免由于試劑雜質影響導致計量不通過。重鉻酸鉀保存時保持密封、干燥以防受潮，而且保存和配制的時候盡量避光。

另外如果具備條件，建議考慮直接購買具有證書的配制好的重鉻酸鉀標準溶液，避光保存，開封后四小時內使用，這樣可以消除試劑和配制帶來的影響。

以上就是紫外可見分光光度計吸光度準確度校驗時容易忽視的一些小細節，把握好這些小細節，同時再配以島津一流的分光光度計，大家在紫外校驗的路上一定能順利達到目標。