概述
真菌毒素是真菌在適宜環境條件下產生的次級代謝產物,在農作物、食品、飼料及中藥中污染較為普遍,目前已知的真菌毒素有400多種,常見的真菌毒素有黃曲霉毒素、赭曲霉毒素、展青霉素、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、伏馬毒素等。真菌毒素是天然存在而非人為添加的,盡管污染量小,但危害性大。在適宜的環境因素(如溫度、濕度)條件下,食品可以直接感染真菌并被其產生的毒素污染,且這種污染可以發生在食品鏈的任何階段如生產、加工處理、運輸和儲藏過程等。據聯合國糧農組織(FAO)統計,全球每年有25%的食品會受到不同程度的真菌毒素污染。
真菌毒素的危害
大多數真菌毒素可抑制動物體內蛋白的合成,破壞細胞結構,進而影響動物體肝臟、腎臟等器官的正常運作。人或動物攝入被真菌毒素污染的農、畜產品,或通過吸入及皮膚接觸真菌毒素可引發多種毒害作用,如致幻、催吐、皮炎、中樞神經受損,甚至死亡;許多真菌毒素還可在體內積累后產生致癌、致畸、致突變和免疫毒性,這些均對人和動物的生命與健康造成重大威脅。
國內限量及監測
我國食品安全限量標準《食品安全國家標準 食品中真菌毒素限量》(GB 2761-2017)中規定了6種真菌毒素在不同類別食品中的限量值。由于真菌毒素污染的普遍性和危害的嚴重性,每年的食品安全監督抽檢均包含真菌毒素的檢測項目,2022年新版《國家食品安全監督抽檢實施細則》中檢測的真菌毒素種類與GB 2761-2017一致,食品涉及糧食加工品、食用油、油脂及其制品、調味品、飲料、罐頭等17大類食品。小編列出了所測毒素的限量值、檢測方法及檢測儀器。
目前常用的檢測真菌毒素的方法有:薄層色譜法(TLC)、酶聯免疫法(ELISA)、膠體金法、液相色譜法(HPLC)以及液質聯用法(LC-MS/MS),其中LC 和LC-MS/MS最為常用。
在真菌毒素檢測方面,島津開展了大量的工作,推出了多重島津分析儀器真菌毒素檢測的解決方案。
01 液相色譜 黃曲霉毒素柱后化學衍生分析系統
該系統具有靈敏度高的熒光檢測器以及性能優異的化學反應器,溫控精密度高,確保反應效率穩定和良好的重現性;同時高效的軟件,可以提高工作效率。
應用示例—中藥材蓮子中黃曲霉毒素的測定:結果見下圖,標準曲線線性方程相關系數均>0.999,添加回收平均回收率在78.7~95.0%之間,RSD為0.71~1.44%,重現性試驗化合物保留時間和峰面積RSD見下表,從結果可以看出,該系統完全滿足檢測的需求。
02 液相色譜 黃曲霉毒素柱后光衍生系統
島津柱后光衍生系統采用高品質的紫外光源和電路元器件,光源壽命高達9000小時;且衍生系統延遲體積小,衍生效率高;無需化學衍生試劑和高溫反應系統,操作簡單、安全。PR-1000光化學衍生器可使黃曲霉毒素B1和G1的熒光強度增強4-6倍,滿足高靈敏度分析需求。
值得一提的是,無論是光衍生系統還是化學衍生系統,都可以基于島津不同系列的HPLC搭建,可以靈活選擇您的配置方案哦。
03 i-Series 液相色譜 真菌毒素分析方法包
使用內置的二極管陣列檢測器及外置的熒光檢測器(RF-20AXs),方法包包含專用色譜柱、方法文件、必要組件及使用說明書等;
使用此方法包可在14 min以內實現10種常見真菌毒素的高靈敏度檢測。無需衍生的情況下滿足各國標準的最低檢測要求。
04 LC-MS/MS法測定真菌毒素
島津LC-MS/MS生物毒素數據庫包含了谷物、水果、水產品中常見的100余種生物毒素的化合物信息、MRM參數、分析方法及操作指南,幫助用戶快速建立分析各種毒素的方法。同時島津還提供多個LC-MS/MS法測定真菌毒素的應用分享,客戶可在島津官網免費下載。
應用實例:島津參考標準NY/T 3803-2020飼料中37種霉菌毒素的測定 液相色譜-串聯質譜法,建立了37種毒素的LC-MS/MS檢測方法。該方法采用正負模式同時掃描的方法,一針進樣可在16 min完成37種生物毒素的同時檢測;通過方法學考察此方法靈敏度高,分析時間短,結果準確,可用于飼料中多種霉菌毒素的定量檢測。
島津Q-TOF篩查真菌毒素
目前,高分辨質譜法在非法物質篩查,未知組分鑒定等多個領域應用越來越廣泛,如下面發布的農業農村部公告均采用了高分辨質譜法對化合物進行篩查和確認。
√ 農業農村部公告第312號 飼料中風險物質的篩查與確認導則 液相色譜–高分辨質譜法(LC–HRMS)。
√ 農業農村部公告第197號-9-2019 畜禽血液和尿液中150種獸藥及其它化合物鑒別和確認 液相色譜-高分辨串聯質譜法。
針對真菌毒素,島津建立了Q-TOF生物毒素數據庫,包括GB 2761中毒素在內的50余種真菌毒素的化合物信息及不同碰撞能(CE)下的300多張二級質譜圖,可以對常見的真菌毒素進行篩查和確認。